- 試劑盒組成?
| Component |
DNE71
(50 preps)
|
| PowerBead Pro | 40 g |
| Sodium Phosphate Buffer | 50 ml |
| MT Buffer | 10 ml |
| PPS (Protein Precipitation Solution) | 10 ml |
| IRS Solution | 10 ml |
| Buffer WB1 | 25 ml |
| Buffer WB2 | 13 ml（Add indicated ethanol before first use） |
| Buffer EB | 10 ml |
| Spin Columns AC with Collection Tubes |
50 |
- 保存方法
- 產品介紹
? 使用Onestep-Lysis? Plus DNA Kit for Soil and Feces (Bead Beating)可以在20 min內快速、有效地從土壤等環境樣品中直接分離出純度較高且滿足建庫測序的高質量基因組DNA。快速DNA提取方法不使用有害的有機溶劑，如苯酚和氯仿。該試劑盒采用一種全新的、獨特的方法來去除包括一些難處理的環境樣本類型，如堆肥、淤泥、沉積物和糞肥，可從土壤樣品中提取所有的細菌、真菌、植物和動物的基因組DNA。
試劑盒包括四個部分：
1. 裂解
高強度陶瓷研磨珠，旨在有效地溶解所有不同來源的微生物，包括真菌孢子和芽孢、革蘭氏陽性細菌、酵母、藻類、線蟲和真菌。使用類似MP的FastPrep珠磨設備進行研磨混勻處理，可在40 s內將土壤微生物細胞進行裂解。
2. 均質化試劑
MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer都經過精心挑選和準備，使完整的樣本均質化和蛋白增溶，提取的基因組DNA含有最少的RNA殘留。
3. 雜蛋白和腐殖酸去除試劑
PPS和IRS Solution分別用來沉淀樣本中雜蛋白和高腐殖酸，防止其對后續實驗造成抑制。
4. DNA純化和洗脫試劑
使用專門的硅膠基質膜進行程序化DNA純化步驟，同時消除污染物，抑制污染物帶來的并發反應。
*Buffer WB2（鹽乙醇洗滌液，第一次使用前加入52 ml無水乙醇）
*Spin Columns AC（DNA吸附硅膠柱）
*Buffer EB（DNA洗脫液）
試劑盒包括四個部分：
1. 裂解
高強度陶瓷研磨珠，旨在有效地溶解所有不同來源的微生物，包括真菌孢子和芽孢、革蘭氏陽性細菌、酵母、藻類、線蟲和真菌。使用類似MP的FastPrep珠磨設備進行研磨混勻處理，可在40 s內將土壤微生物細胞進行裂解。
2. 均質化試劑
MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer都經過精心挑選和準備，使完整的樣本均質化和蛋白增溶，提取的基因組DNA含有最少的RNA殘留。
3. 雜蛋白和腐殖酸去除試劑
PPS和IRS Solution分別用來沉淀樣本中雜蛋白和高腐殖酸，防止其對后續實驗造成抑制。
4. DNA純化和洗脫試劑
使用專門的硅膠基質膜進行程序化DNA純化步驟，同時消除污染物，抑制污染物帶來的并發反應。
*Buffer WB2（鹽乙醇洗滌液，第一次使用前加入52 ml無水乙醇）
*Spin Columns AC（DNA吸附硅膠柱）
*Buffer EB（DNA洗脫液）
- 實驗例
?
土壤基因組提取結果：起始量：250 mg，50 μl洗脫，2 μl電泳上樣，1%瓊脂糖凝膠電泳結果。M：Marker III。
1：腐殖土；2：淤泥；3：堆積物；4：農田土；5：沙子；6：實驗室粉塵。
動物糞便DNA提取結果：起始量：250 mg，50 μl洗脫，1.5 μl電泳上樣，1%瓊脂糖凝膠電泳結果。M：DL15000 Marker。
1：狗糞便；2：鴿子糞便；3：牛糞便；4：海蝦腸道內容物。
土壤基因組提取結果：起始量：250 mg，50 μl洗脫，2 μl電泳上樣，1%瓊脂糖凝膠電泳結果。M：Marker III。
1：腐殖土；2：淤泥；3：堆積物；4：農田土；5：沙子；6：實驗室粉塵。
動物糞便DNA提取結果：起始量：250 mg，50 μl洗脫，1.5 μl電泳上樣，1%瓊脂糖凝膠電泳結果。M：DL15000 Marker。
1：狗糞便；2：鴿子糞便；3：牛糞便；4：海蝦腸道內容物。
